酶标仪的检测原理

光是电磁波，波长100nm～400nm称为紫外光，400nm～780nm之间的光可被人眼观察到，大子780nm称为红外光。人们只所以能够看到色彩，是因为光照射到物体上被物体反射回来。绿色植物之所以是绿色，是因为植物吸收了光中的红色光谱。酶标仪的检测原理是在特定波长下，检测被测物的吸光值。
　　检测单位：
　　光通过被检测物，前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量，特定波长下，同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。
　　检测单位用OD值表示， OD是optical delnsity（光密度）的缩写，表示被检测物吸收掉的光密度， OD＝1og（1／trans），其中trans为检测物的透光值。根据Bouger-amberT-beer法则，OD值与光强度成下述关系：
E＝OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度，Ι0为在检测物之前的光强度，Ι为从被检测物出来的光强度。
　　OD值由下述公式计算：
　　E＝OD=C×D×E
　　C为检测物的浓度
　　D为检测物的厚度
　　E为摩尔因子
　　在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长，在此波长下，此物质能够吸收*多的光能量。如果选择其它的波长段，就会造成检测结果的不**。因此，在测定检测物时，我们选择特定的波长进行检测，称为测量波
长。
　　但是每一种物质对光能量还存在一定的非特异性吸收，为了消除这种非特异性吸收，我们再选取一个参照波长，以消除这个不**性。在参照波长下，检测物光的吸收*小。检测波长和参照波长的吸光值之差可以消除非特异性吸收。
　　Anthos 酶标仪检测值计算
　　仪器中的检测器接收透过被检测物的光能量，转换成二进位数字信号，*大为4095。仪器定义没有光源下的透光值为 0％，没有检测物的透光值为100％。则实际检测中，检测物的透光值均在 0％一100％之间。透光值
的计算如下：
　　T＝（Meas—Min）／（Max—Min）
　　其中T为透光值， Meas为检测的二进位数值，Min为在0％的情况下检测的二进位数值， Max为在100％的情况下检测的二进位数值，举例如下：
　　MaX=3600Mn=20Meas＝30
　　T=（30-20）/3600-20)＝0．0028
　　OD＝1og（1/T）=1og（1/0.0028）=2.552

Anthos 酶标仪的中心定位
　　仪器会自动对酶标孔进行中心定位，中心定位是要消除酶标孔底的凸凹引起的厚薄不均带来检测的不**。在对每一个酶标仪进行检测时，仪器其实要进行35个点的测量，选取*中间的5个点的均值为本孔的OD值。
　　光源的参照通道
　　参照通道是用来校准由于电压不稳或灯泡磨损带来的影响。
　　酶标仪的用途和其它提示
　　用于ELISA试剂的测定，广泛用于各种实验室，包括临床实验室。
　　质量控制
　　质量控制是试剂检测的重要因素。请按照试剂说明书的要求进行质量控制。
　　空白校正
　　有一些试剂盒的说阴书将空白孔设置为空气，其它大多数空白孔的设置是用试剂来设置的，请按照试剂盒的说明书要求进行。
　　检测结果的解释
　　由于有相当多的因素会影响检测的结果，如不同的酶标板，检测试剂的体积，都会造成OD值的不同，因此，只有使用同一酶标板反应的试剂检测结果才能比较和分析。对结果的临床解释请依照试剂盒的说明书进行。酶标仪的检测原理。

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