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紫外分光光度计的原理详细介绍
日期:2025-08-19 07:38
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摘要:
物质的吸取光谱本质上就是物质中的分子和原子吸取了入射光中的某些特定波长的光能量,相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸取光能量的情况也就不会相同。因此,每种物质就有其特有的、固定的吸取光谱曲线,可根据吸取光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量,这就是分光光度定性和定量分析的基础。紫外分光光度计分析就是根据物质的吸取光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。
又因为许多物质在紫外分光光度计-可见光区有特征吸取峰,所以可用紫外分光光度法对这些物质分别进行测定(定量分析和定性分析)。紫外分光光度法使用基于朗伯-比耳定律。
朗伯-比耳定律(Lambert-Beer)是光吸取的基本定律,俗称光吸取定律,是分光光度法定量分析的依据和基础。当入射光波长一定时,溶剂的吸光度A是吸光物质的浓度C及吸取介质厚度l(吸取光程)的函数。
首先确定实验条件,并在此条件下测得标准物质的吸取峰以及其对应波长值(同时可获得该物质的*大吸取波长);紫外分光光度计再在选定的波长范围内(或***长值处),分别以(不同浓度)标准溶剂的吸光度和溶剂浓度为横、纵坐标绘出化合物溶剂的标准曲线得到其所对应的数学方程;接着在相同实验条件下配制待测溶剂,测得待测溶剂的吸光度,*后用已获得的标准曲线方程求出待测溶剂中所需测定的化合物的含量。
凡具有芳香环或共轭双键结构的有机化合物,根据在特定吸取波长处所测得的吸取度,可用于药品的鉴别、纯度检查及含量测定。
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