PCR技術的定義及其基本原理
PCR技術的定義及其基本原理，PCR定義 PCR（PolymeraseChainReaction）即聚合酶鏈式反應，是指在DNA聚合酶催化下，以母鏈DNA為模板，以特定引物為延伸起點，通過變性、退火、延伸等步驟，體外複製出與母鏈模板DNA互補的子鏈DNA的過程。是一項DNA體外合成放大技術，能快速特異地在體外擴增任何目的DNA。可用於基因分離克隆，序列分析，基因表達調控，基因多態性研究等許多方麵。
PCR技術的基本原理一、PCR反應成分： 1、模板DNA； 2、引物； 3、四種脫氧核糖核苷酸；4、DNA聚合酶；5、反應緩衝液、Mg2+等。二、PCR反應基本步驟：1、變性(denaturation)：通過加熱使模板DNA的雙鏈之間的氫鍵斷裂，雙鏈分開而成單鏈的過程，高溫使雙鏈DNA解離形成單鏈（94℃，30s）。 2、退火(annealling)：當溫度降低時，引物與模板DNA中互補區域結合成雜交分子，低溫下，引物與模板DNA互補區結合（55℃，30s）。 3、延伸(extension)：在DNA聚合酶、dNTPs、 Mg2+存在下，DNA聚合酶催化引物按5’→3’方向延伸，合成出與模板DNA鏈互補的DNA子鏈，中溫延伸，DNA聚合酶催化以引物為起始點的DNA鏈延伸反應（70～72℃，30～60s） 以上述三個步驟為一個循環，每一循環的產物均可作為下一個循環的模板，經過n次循環後，目的DNA以2n的形式增加。
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