光學顯微攝影的常見方法

光學顯微攝影的常見方法，顯微鏡是一種觀察微觀事物的重要光學儀器。利用它的高倍放大作用可以觀察到肉眼直接看不到的信息。顯微攝影又可以把顯微鏡觀察到的現象記錄下來，供人們更廣泛的研究。顯微鏡分為光學顯微鏡和非光學顯微鏡兩類。（非光學顯微鏡有電子顯微鏡、超聲波顯微鏡等）普通光學顯微攝影裝置就是將普通相機與顯微鏡組合在一起，利用相機記錄本來由人眼觀察的顯微圖像。

（1）光學顯微攝影的用光方法拍攝顯微照片，要求有明亮、均勻、無反光的照明條件，其照明方法可分為兩類，即透射照明和反射照明（落射光照明）透射光照明是指從光源射出的光線從標本的下麵透過標本進入物鏡。而落射照明是指光線從正麵投射到標本的正麵，物鏡接受的光是從標本反射來的光。透射光照明通常按照克列爾（Kohler）照明法調節光路便可以獲得上等效果。使用時調節光源光闌和距離使照明光束投射到反光鏡中央。關閉聚光鏡光闌，移動光源透鏡，使燈絲清晰地在聚光鏡的孔徑光闌平麵成像。先將樣品聚焦，隨後從載物台上除去標本，通過目鏡對焦，上下移動對焦器，直到標本平麵上出現光源光闌的像。聚光器光闌通常收縮至0.6～0.7厘米（直徑），與光源光闌配合，除去光斑得到鮮明的像。在高倍顯微攝影時，要一麵收縮聚光器光闌，一麵觀察，使出現的燈絲像達到*大，大約使光源距離距顯微鏡達40-50cm為好。落射光照明主要用於拍攝不透明的標本，如皮膚、小生物、植物果實表麵等。拍出的像有立體感。落射光與物鏡之間的角度越小越好，現代顯微攝影裝置的落射光大多與物鏡合軸。在冇有**設備的情況下可以用斜射照明，在對應麵加反光屏，或用另一隻燈做輔助光，也可以使用環形閃光燈。

（2）光學顯微攝影中濾色鏡的應用濾色片幾乎在拍攝什麼樣的標本都有用場。例如：用濾色片校正反差突出重點光學顯微攝影往往要突出重點，這就要使用適當的濾色鏡加強反差，強調需要突出的重點結構，而減弱其非重點部分。使用標本染色補色的濾色鏡可以增強標本反差，比如蘇木精染出的色標本中用綠濾色鏡，就可增強反差。兩種顏色的結構體現：如果想使標本中兩種以上的顏色都清楚地呈現在畫麵上，如紅、藍兩種顏色，可以采取兩次曝光的方法，先用紅濾色鏡，再用藍濾色鏡各曝一次光，就可以清楚地體現兩種顏色的結構。 

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