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PCR儀器溫度控製性能的影響因素

日期:2025-05-15 11:49
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摘要:

PCR儀器溫度控製性能的影響因素

一、PCR儀器之間的差彆對實驗結果的影響。如前所述,冇有任何兩台PCR儀器的溫度控製是一模一樣的。相對於預設的溫度模塊溫度總是偏高或偏低,就是同一模塊不同的孔之間,溫度有時也會不一樣,相差可能達幾攝氏度之多。一些PCR儀溫度控製性能的不足造成的後果是:當PCR儀的模塊溫度在升溫時,溫度過衝或不足,不能**的達到預設的平台溫度。

二、溫度控製技術的差彆對實驗結果的影響。導致PCR儀溫度控製性能*劣的因素,首先是溫度控製技術。調節PCR儀模塊的溫度,使其達到並保持在某一溫度有很多方式。每一種方式都有*點和缺點。另外,這些技術被運用控製的水平對於溫度控製的水準是很重要的,且有很大不同。大多數PCR儀器的溫度控製性能是很差的。在單一或多傳感器控製機製上的不同顯而易見的引起了溫度的不均一性。

三、儀器老化對實驗結果的影響。雖然PCR儀冇有任何的機械或可移動部件,但是那並不意味著它不會磨損。電子器件的性能會隨著時間的延長而老化,並由於過度的使用而加速老化。Peltier器件的失效或磨損會引起模塊的熱斑或冷斑,通常PCR儀器不能識彆這種由於機械磨損,模塊延展和收縮效應引起的溫控性能的不同。因此,為掌握這些情況,實時監測PCR儀的溫度控製性能是重要的。出於同樣的原因,PCR儀溫控性能的失常通常是實驗失敗或毀壞循環反應的重要原因。

四、外部因素對實驗結果的影響。不同PCR儀**與型號在溫度控製性能上的不同直接影響了三種溫度平台的溫度的**性和不均一性,因而影響了整個PCR反應的實驗結果。另外,升溫速度的不同,溫度下降梯度的不均一性,溫度過低,溫度過衝,也是重要的因素。*差的情況,一個本該陽性的結果卻可能得出陰性的結果。對於實時PCR,熒光信號輸出和產量/溶解曲線,直接與溫度控製有關係,而這些結果很可能是戲劇性的。

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