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分光光度計*常見的用途和常用波長
日期:2025-05-08 23:23
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摘要:
分光光度計*常見的用途和常用波長
1.核酸的定量核酸的*高吸收峰的吸收波長260 nm。利用260nm的波長可以定量測量溶於緩衝液的寡核苷酸,單鏈、雙鏈DNA,以及RNA的濃度。除了核酸濃度,分光光度計同時顯示幾個非常重要的比值表示樣品的純度。如A260/A280的比值,用於評估樣品的純度,因為蛋白的吸收峰是280nm。純淨的樣品,比值大於1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低於1.8 或者2.0,表示存在蛋白質或者酚類物質的影響。 A230表示樣品中存在一些汙染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,較純淨的核酸A260/A230的比值大於2.0。 A320檢測溶液的混濁度和其他乾擾因子。純樣品,A320一般是0。
2.蛋白質的直接定量這種方法是在280nm波長,直接測試蛋白。選擇Warburg 公式,光度計可以直接顯示出樣品的濃度,或者是選擇相應的換算方法,將吸光值轉換為樣品濃度。
3.**細胞密度**培養過程中,需要采用分光光度計準確測定**細胞密度。 OD600是追蹤液體培養物中微生物生長的標準方法。在600nm波長下,以未加菌液的培養液作為空白液,測量定量培養後的含菌培養液。
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