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PCR基因擴增儀的分類及應用
日期：2025-05-06 16:44
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摘要：
根據DNA擴增的目的和檢測的標準可以將PCR儀分為普通PCR儀，梯度PCR儀，原位PCR，實時熒光定量PCR儀等幾類。
PCR的要素
基本的PCR須具備
1.要被複製的DNA模板 (Template)。
2.界定複製範圍兩端的引物 (Primers)。
3.DNA聚合酶 (Taq. Polymearse)。
4.合成的原料及水。
PCR的反應包括三個主要步驟，分彆是1).Denaturation 2).Annealing of primers and
3).Extension of primers。所謂 Denaturing 乃是將DNA加熱變性， 將雙股的DNA加熱後轉為單股DNA以做為複製的模板。而 Annealing 則是令 Primers 於一定的溫度下附著於模板DNA兩端。*後在DNA聚合酶 (e.g. Taq-polymerase) 的作用下進行引物的延長 (Extension of primers) 及另一股的合成。
PCR基因擴增儀的分類及應用：
1.普通PCR儀
一般把一次PCR擴增隻能運行一個特定退火溫度的PCR儀，稱之為普通PCR儀。如果要用它做不同的退火溫度則需要多次運行。主要是用作簡單的，對目的基因退火溫度的擴增。主要應用於科研、教學、臨床醫學、檢驗、檢疫等。
2.梯度PCR儀
一次性PCR擴增可以設置一係列不同的退火溫度條件（通常12種溫度梯度）的稱之為梯度PCR儀。因為被擴增的不同的DNA片段其*適合的退火溫度不同，通過設置一係列的梯度退火溫度進行擴增，從而一次性PCR擴增就可以篩選出表達量高的*適合退火溫度進行有效的擴增。主要用於研究未知DNA退火溫度的擴增，這樣既節約時間，也節約經費。在不設置梯度的情況下亦可當做普通的PCR用。
梯度PCR儀多應用於科研、教學機構。
3.原位PCR儀
是用於從細胞內靶DNA的定位分析的細胞內基因擴增儀。如病原基因在細胞的位置或目的基因在細胞內的作用位置等。可保持細胞或組織的完整性，使PCR反應體係滲透到組織和細胞中，在細胞的靶DNA所在的位置進行基因擴增。不但可以檢測到靶DNA，還能標出靶序列在細胞內的位置。於分子和細胞水平上研究**的發病機理和臨床過程及病理的轉變有著重大的實用價值。
具有普通型PCR儀和梯度型PCR儀的功能.
4.實時熒光定量PCR儀
在普通PCR儀基礎上增加一個熒光信號采集係統和計算機分析處理係統，就成了熒光定量PCR。其PCR擴增原理和普通PCR擴增原理相同，隻是在PCR擴增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進行標記，使用引物和熒光探針同時與模板特異性結合擴增。擴增的結果通過熒光信號采集係統實時采集信號連接輸送到計算機分析處理係統，得出量化的實時結果輸出。
熒光定量PCR儀有單通道，雙通道和多通道之分。當隻用一種熒光探針標記的時候，選用單通道；有多種熒光標記的時候使用多通道。單通道也可以檢測多熒光的標記和目的基因表達產物，因為一次隻能檢測一種目的基因的擴增量，需多次擴增才能檢測完不同的目的基因片段的量。
實時熒光定量PCR儀主要應用於臨床醫學檢測、生物醫藥研發、食品行業、科研院校等
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