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使用紫外可見分光光度計必看知識
日期：2025-05-07 09:56
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摘要：
紫外可見分光光度計是實驗室必備儀器之一，主要是用來對物質做定性、定量分析。可廣泛應用於生化化學、石油化工、環境保護、醫療衛生、臨床檢驗等領域。
一、紫外可見分光光度計外光路係統
1.紫外可見分光光度計的外光路係統一般由光源、反射鏡或透鏡組成。光源一般都是由氘燈和鎢燈( 鹵鎢燈) 及其燈架組成, 反射鏡一般用凹麵反射鏡,有些儀器的外光路係統采用透鏡或柱麵鏡。這些鏡子的作用是把光源發出的光成像在單色器的入射狹縫上, 或者說, 把光源發出的光集中到單色器的入射狹縫上, 並均勻照明單色器的入射狹縫。所以說, 光源的燈絲和入射狹縫是物像關係。
2.紫外可見分光光度計的外光路大體上有以下四種形式。①氘燈和鎢燈位於凹麵反射鏡的同側。光源切換是通過電機帶動平麵反射鏡移動來實現的。②氘燈和鎢燈位於凹麵反射鏡的兩側。氘燈和鎢燈固定不動( 見圖3-12) , 光源切換是通過電機帶動凹麵反射鏡震動來實現的。③氘燈和鎢燈固定在一個組座上。凹麵反射鏡是固定的(見圖3-13)。光源切換是通過電機帶動氘燈和鎢燈固定組座移動來實現的。④氘鎢燈固定在凹麵反射鏡的一側。若采用氘鎢燈( 氘燈和鎢燈作在一起) , 則氘鎢燈位於凹麵鏡的左側或右側, 凹麵鏡固定不動, 光源通過凹麵鏡成像在入射狹縫上。
二、紫外可見分光光度計光度重複性測量方法
光度重複性的測試方法很簡單。一般是選定一個標準樣品（也可用使用者自己任選的樣品），，由同一個操作者，進行3-5次測試，再計算光度重複性。具體操作方法為：儀器冷態開機（即關機2h後開機），預熱半小時後，對標準樣品或使用者自選的樣品進行光譜掃描，然後，在譜圖上選擇幾個特征吸收峰，檢查在選定的測量次數內，各個峰值的*大值與*小值之差即為光度重複性。人們經常將光度**度和光度重複性在一次操作中完成。
三、紫外可見分光光度計線性和**度的關係
**度和線性是兩個完全不同的概念。**度是實驗值與真值之差，而線性則是實驗點偏離比耳定律直線部分的程度，兩者不能混淆。應該指出，**度一般不能直接反映儀器的線性和線性範圍，線性和線性範圍一般也不能直接反映儀器的**度。
四、紫外可見分光光度計測試數據不**的檢查方法
1.測試試樣是否光解：由於紫外可見分光光度計紫外光照射樣品，致使試樣發生光化學反應，從而引起樣品的濃度變化，會使測試結果不**。這種現象的發生時，應注意對樣品進行避光保護，一般是用黑紙包住樣品或采用棕色器皿裝樣品。
2.測試波長是否合適：由於測試波長不合適，可能會因為摩爾吸光係數不同，致使靈敏度不同，所以產生分析測試誤差。因此，要認真選擇測試波長。一般來說，要選擇*大吸收波長作為測試波長，可**得到較大的信號，從而提高性噪比，**分析測試數據的可靠性。
3.測試比色皿是否沾汙：比色皿沾汙是很重要的問題，有時測試熏差增大，就是比色皿沾汙的結果。除數據不準外，有時，出怪峰、負峰，也是比色皿沾汙所引起的。如比色皿沾汙，可用20W的玻璃儀器超聲波清洗30min，一般都可以解決問題。但是*不能采用大功率超聲波來清洗比色皿，否則會損壞比色皿。目前國內外的各類比色皿，一般都分為燒結或粘接兩種。不管是哪一種，隻要用大功率超聲波清洗，肯定會毀壞比色皿。所以，使用者一定要認真對待比色皿沾汙的問題。
五、紫外可見分光光度計日常護理
1.溫度和濕度是影響可見分光光度計性能的重要因素。他們可以引起機械部件的鏽蝕，使金屬鏡麵的光潔度下降，引起PH溶解氧儀部分的誤差或性能下降；造成光學部件如光柵、反射鏡、聚焦鏡等的鋁膜鏽蝕，產生光能不足、雜散光、噪聲等，甚至儀器停止工作，從而影響儀器壽命。維護保養時應定期加以校正。應具備四季恒濕的儀器室，配置恒溫設備，特彆是地處南方地區的實驗室。
2.環境中的塵埃和腐蝕性氣體也會影響機械係統的靈活性、降低各種限位開關、按鍵、光電偶合器的可靠性，也是造成必須學部件鋁膜鏽蝕的原因之一。因此必須定期清潔，保障環境和儀器室內衛生條件，防塵等。
3.紫外可見分光光度計使用一定周期後，內部會積累一定量的塵埃，*好由維修工程師或在工程師指導下定期開啟儀器外罩對內部進行除塵工作，同時將各發熱元件的散熱器重新緊固，對光學盒的密封窗口進行清潔，必要時對光路進行校準，對機械部分進行清潔和必要的潤滑，*後，恢複原狀，再進行一些必要的檢測、調校與記錄
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3.紫外可見分光光度計使用一定周期後，內部會積累一定量的塵埃，*好由維修工程師或在工程師指導下定期開啟儀器外罩對內部進行除塵工作，同時將各發熱元件的散熱器重新緊固，對光學盒的密封窗口進行清潔，必要時對光路進行校準，對機械部分進行清潔和必要的潤滑，*後，恢複原狀，再進行一些必要的檢測、調校與記錄
