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紫外分光光度計正確測DNA濃度方法
日期：2025-05-06 22:13
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摘要：
首先，分光光度計測量的樣品必須是均一的，搖勻後再測量結果會**些。它是利用分光光度法對物質進行定量定性分析的儀器。
一般用微量分光光度計比較快速簡便，DNA濃度會直接在軟件上顯示，A260 / A280的比值用於評估樣品的純度， 純淨的樣品比值大於1.8，低於2.0。較純淨的核酸A260/A230的比值大於2.0。
核酸的定量是分光光度計使用頻率*高的功能。可以定量溶於緩衝液的寡核苷酸，單鏈、雙鏈DNA，以及RNA。核酸的*高吸收峰的吸收波長260 nm。每種核酸的分子構成不一，因此其換算係數不同。定量不同類型的核酸，事先要選擇對應的係數。如：1OD 的吸光值分彆相當於50μg/ml的dsDNA，37μg/ml的ssDNA，40μg/ml的RNA，30μg/ml的Olig。測試後的吸光值經過上述係數的換算，從而得出相應的樣品濃度。測試前，選擇正確的程序，輸入原液和稀釋液的體積，爾後測試空白液和樣品液。然而，實驗並非一帆風順。讀數不穩定可能是實驗者***的問題。靈敏度越高的儀器，表現出的吸光值漂移越大。
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