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不得不看的二氧化碳培養箱無汙染控製技術
日期:2025-05-06 12:30
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摘要:
在生物活體內,生物體有自身的**係統保護細胞或組織,但是在體外培養時,冇有任何保護自己的**屏障。對於二氧化碳培養箱的基本參數溫度、CO2 和濕度,大多數培養箱都能滿足研究實驗的需要。然而,針對培養過程中麵臨的各種汙染源,各**二氧培養箱的控製方式和效果不儘相同,因此細胞體外培養中*大的威脅實際上是汙染問題。
二氧化碳培養箱裡的主要汙染源:**(黴菌和酵母菌)、**、病毒、支原體、非同種細胞。 對於細胞來說,非常理想的培養環境同樣也適合這些汙染物的生存,培養箱本身是不會辨彆的,而細胞培養中大部分時間裡細胞都是位於培養箱內,因此箱體內能否抑菌或**非常關鍵!
1、**(黴菌和酵母菌):**生長的比較慢,不象**那麼容易被發現,但是一旦發現有它的存在細胞就被汙染了;目前冇有好的抑製方法,包括現在常用的兩性黴素,一旦汙染容易反複爆發,尤其孢子很難殺滅。
2、**:**汙染後,培養基1-2天就會變色,對細胞生長影響明顯,應迅速將汙染細胞與其它細胞係隔離,**後丟棄,還要用實驗室**劑**培養器皿和超淨台。
3、病毒:由於病毒寄生生存,爆發後儘快和正常細胞隔離,丟棄處理,相對來說容易處理,對操作者威脅較大;儘管病毒汙染的細胞不影響原代培養,但生產疫苗是不**的。因此,潛在病毒是細胞大量生產和疫苗、乾擾素等生物製品製作中的難題。


4、支原體:支原體汙染後,因為它們不會使細胞死亡可以與細胞長期共存,培養基一般不發生渾濁,細胞無明顯變化,外觀上給人以正常感覺,實則細胞已經受到多方麵潛在影響,如引起細胞變形,影響DNA合成,抑製細胞生長等,往往被大多數實驗者忽視。
5、非同種細胞:即細胞交叉汙染,由於細胞培養操作時各細胞株所需的器材和溶液冇有嚴格分開,往往會使一種細胞被另一種細胞汙染。目前,**上已有幾十種細胞都被HeLa細胞所汙染,致使許多實驗宣告無效。
因此,以上汙染一旦發生,細胞*後基本隻能丟棄,實驗無法挽救,對於許多取樣困難的實驗損失無法估量!
目前,二氧化碳培養箱的**技術主要有乾熱、濕熱、紫外燈照射、**劑擦拭等。
高溫乾熱空氣**是目前****的*有效的**技術,能徹底消滅**微生物汙染源(包括耐高溫的芽孢杆菌);濕熱**通常用於高壓蒸汽**中,比較少用在CO2培養箱上,濕熱**在常壓下又叫煮沸法,煮沸的水溫一般至少需為100℃,**繁殖體煮沸5分鐘被殺死,但芽胞常需煮沸2小時以上才可被殺死;紫外燈照射法的有效性受很多因素影響,如遮擋、時間、強度、照射距離,濕度等,**效果很難**;**劑擦拭法是對表麵**的方法,適合於平整的表麵如實驗台麵,而箱體內部設計的死角、各種器件因無法擦拭等因素導致**效果也很有限,而且含氯、碘的**劑對於不鏽鋼有腐蝕作用,不能對不鏽鋼箱體進行擦拭**
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