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熒光分光光度計原理

日期:2025-05-06 08:05
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摘要:

很多用戶對於熒光分光光度計的原理不是很了解,為了讓大家對熒光分光光度計的原理有一個深刻的了解,上海旦鼎技術人員特意為您提供了以下資料。並為您區彆熒光分光光度計與紫外分光光度計的不同之處。
      熒光分光光度計圖
一、熒光分光光度計原理
熒光分光光度計是用於掃描液相熒光標記物所發出的熒光光譜的一種儀器。其能提供包括激發光譜、發射光譜以及熒光強度、量子產率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數,從各個角度反映了分子的成鍵和結構情況。
物質熒光的產生是由在通常狀況下處於基態的物質分子吸收激發光後變為激發態,這些處於激發態的分子是不穩定的,在返回基態的過程中將一部分的能量又以光的形式放出,從而產生熒光。
不同物質由於分子結構的不同,其激發態能級的分布具有各自不同的特征,這種特征反映在熒光上表現為各種物質都有其特征熒光激發和發射光譜,因此可以用熒光激發和發射光譜的不同來定性地進行物質的鑒定。
在溶液中,當熒光物質的濃度較低時,其熒光強度與該物質的濃度通常有良好的正比關係,即IF=KC,利用這種關係可以進行熒光物質的定量分析,與紫外-可見分光光度法類似,熒光分析通常也采用標準曲線法進行。
熒光分光光度計原理圖 
二、熒光分光光度計與紫外分光光度計的區彆
兩種儀器的原理完全不同。
1、熒光分光光度計由高壓汞燈或氙燈發出的紫外光和藍紫光經濾光片照射到樣品池中,激發樣品中的熒光物質發出熒光,熒光經過濾過和反射後,被光電倍增管所接受,然後以圖或數字的形式顯示出來。
2、紫外分光光度計是根據朗伯-比耳定律(Lambert-Beer)光吸收的基本定律,即物質中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量。
通俗的說,熒光分光光度計是測樣品中物質被激發出了光能量,紫外分光光度計是測樣品中物質吸收了光能量,原理完全不同。
 
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