生物醫學顯微攝影操作步驟
生物顯微攝影(Microphotography)是利用攝影裝置來拍攝顯微鏡視野中所觀察到的物像。在生物醫學方麵,主要用於對正常細胞或病變細胞的顯微形態學研究記錄。生物醫學顯微攝影操作步驟:
一準備步驟
拍攝前作以下預備工作,調整顯微鏡至*佳狀態。
1.光路合軸 使光軸與光束處於同一軸線上。
2.柯勒氏照明 使觀察的視野獲礙均勻而又充分的照明;防止雜散光對照相係統產生影響。
3.物鏡與目鏡合理組合 依標本的不同和顯微攝影要求,物鏡與目鏡的組合有一定規範。
4.調整視場光闌和孔徑光闌使兩者與所用物鏡的數值孔徑相等,所得的分辨力*高;視場光闌一旦調好,不要再動,而孔徑光闌可隨物鏡數值孔徑的更換,做相應的調整。
二拍攝步驟
拍攝是顯微攝影係列操作中的關鍵環節,在鏡檢觀察中,發現需要攝下的影像應即時拍照。
1.開啟相機後蓋,安裝膠卷於照相機內。
2.打開顯微鏡照明裝置的電源開關,將亮度調至適當。
3.依個人的視力,調整攝影目鏡調焦環至“井”字線清晰。
4.放一片需要拍攝的標本載玻片於載物台上。在低倍鏡下選好要拍攝的核型或細胞結構,再轉換到油鏡下,聚焦標本細節,準備拍照。
5.按下曝光按鈕,曝光按鈕亮表示曝光開始進行,熄滅表示曝光完畢。
6.拍攝記錄
三膠片衝印步驟
感光膠片在拍攝完畢後,需儘快在暗室中衝洗和曬印,其方法和普通照像相似。
1.把膠片裝入顯影罐中(切勿粘在一起)先用清水衝洗,排除氣泡.然後再把水倒掉,這有利於顯影液的快速均一作用。
2.從*部罐口注入預先配好的約250ml D-72式顯影液。20℃顯影4~12分鐘。
3.顯影中輕輕搖影罐,使膠片表麵充分受顯影液作用,顯影完畢,迅速倒出顯影液。
4.立即注入250ml預先配好的SB—I式停影液,停顯時間為10秒,倒出停影液,隨之加入250ml的F一5式酸性堅膜定影液,20℃定影15分鐘。取出膠片流水衝洗30分鐘以上。
5.將膠片掛起,用脫脂棉輕輕吸掉膠片表麵過多的積水,晾乾。
6.晾乾後用放大機的膠片夾子夾住膠片,藥膜麵朝下,聚焦取景,然後在紅燈條件下,用壓紙板壓住所需號放大像紙,藥膜麵向上.進行曝光(適當的曝光時間要經試驗後決定)。
7.曝光後的像紙,浸入D-72顯影液中,然後用竹鑷子不時地夾住像紙翻動,直到顯影適度為止。
8.顯影合適後立即移到SB-I式停影液中,漂洗10~20秒,再浸入定影液中處理15分鐘,取出在流水中衝洗60分鐘左右。
9.水洗後,放在電熱上光機上烘乾;裁邊,裝入有說明的紙袋內保存。
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